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分光光度計是一種用于測量物質(zhì)在紫外、可見和近紅外光譜區(qū)域的吸收特性的分析儀器?。其基本工作原理基于物質(zhì)對光的選擇性吸收，即不同物質(zhì)對不同波長的光具有不同的吸收能力。當一束單色光通過含有吸收物質(zhì)的溶液時，溶液對光的吸收程度與溶液的濃度和光程長度成正比?12。

分光光度計主要由光源、單色器、樣品池和檢測器四個部分組成。光源提供連續(xù)光譜的光，單色器將復(fù)合光分解為單色光，樣品池用于盛放待測溶液，檢測器則測量透過樣品后的光強度?13。

分光光度計的操作原理基于朗伯-比爾定律，即一束單色光通過含有吸收物質(zhì)的溶液時，溶液對光的吸收程度與溶液的濃度和光程長度成正比。具體來說，當一束單色光通過液層厚度為b的有色溶液時，溶質(zhì)吸收了光能，光的強度會減弱，減弱的光強與溶液的濃度和光程長度成正比關(guān)系?45。

在實際操作中，首先需要選擇合適的波長，因為不同物質(zhì)在不同波長下的吸收特性不同。然后，將待測溶液放入樣品池中，啟動分光光度計進行測量。通過測定標準溶液和待測樣品溶液的吸光度，可以求出待測樣液的濃度。需要注意的是，測量時應(yīng)控制吸光度在合適的范圍內(nèi)，以減少誤差?45。